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移液器
用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具
移液器又稱移液槍，是一種用于定量轉(zhuǎn)移液體的器具。在進行分析測試方面的研究時，一般采用移液器（pipette）移取少量或微量的液體。移液器根據(jù)原理可分為氣體活塞式移液器（Air-displacement pipette）和外置活塞式移液器（Positive-displacement pipette）。移液器也叫移液槍，是在一定量程范圍內(nèi)，將液體從原容器內(nèi)移取到另一容器內(nèi)的一種計量工具。被廣泛用于生物、化學(xué)等領(lǐng)域。
基本信息
| 中文名 | 移液器 |
| 外文名 | locomotive pipette |
| 用于 | 定量轉(zhuǎn)移液體 |
| 移液的方法 | 前進移液法 反向移液法 |
結(jié)構(gòu)
移液器
工作原理
微量移液器加樣的物理學(xué)原理有兩種：使用空氣墊加樣和使用無空氣墊的活塞正移動(positivedisplacement)加樣。這兩種不同原理的微量移液器有其不同的特定應(yīng)用范圍。
常見分類
- 根據(jù)工作原理可分為空氣置換移液器與正向置換移液器；
- 根據(jù)能夠同時安裝吸頭的數(shù)量可將其分為單通道移液器和多通道移液器；
- 根據(jù)刻度是否可調(diào)節(jié)可將其分為固定移液器和可調(diào)節(jié)式移液器；
- 根據(jù)調(diào)節(jié)刻度方式可將其分為手動式移液器和電動式移液器；
- 根據(jù)特殊用途可將其分為全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、連續(xù)注射移液器等。
臨床應(yīng)用
臨床診斷實驗室，生物技術(shù)實驗室，藥學(xué)和化學(xué)實驗室，環(huán)境實驗室，食品實驗室
注意事項
- 在調(diào)節(jié)移液器的過程中，轉(zhuǎn)動旋鈕不可太快，也不能超出其最大或最小量程，否則易導(dǎo)致量不準(zhǔn)確，并且易卡住內(nèi)部機械裝置而損壞移液器。
- 在裝配吸頭的過程中，用移液器反復(fù)強烈撞擊吸頭反而會擰不緊，長期如此操作，會導(dǎo)致移液器中零件松散，嚴(yán)重時會導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
- 當(dāng)移液器吸頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流而腐蝕活塞彈簧。
- 對移液器進行高溫消毒時，應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后在進行處理。
選擇標(biāo)準(zhǔn)
- 性能：準(zhǔn)確性和重復(fù)性
- 耐用性/維護：移液器使用壽命長，僅需要很少的維護或維護成本低
- 符合人體工程學(xué)原理： 手感舒適，吸排液操作力輕，避免重復(fù)性肌勞損，退吸頭力小
- 選擇具有廠商資質(zhì)售后服務(wù)的品牌。
選購
1．產(chǎn)品性能，即移液器的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。對于絕大多數(shù)用戶而言，購買之前檢測產(chǎn)品性能既有難度又無必要。因此，主要還是依據(jù)制造廠商提供的技術(shù)數(shù)據(jù)。但還是不要輕易相信賣家的口頭承諾，一定要查閱制造商提供的書面材料。
2．產(chǎn)品的可靠耐用這一方面，主要取決于移液器所用的材料。對于外殼，應(yīng)當(dāng)有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱性（如PVDF材質(zhì)）；對于活塞，目前市場上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機械性能好、壽命長，只是不太適合用于強酸強堿的移液；陶瓷則有很高的耐腐蝕性，但機械性能較差。當(dāng)然，優(yōu)質(zhì)的材料往往意味著更高的價格，所以需要綜合考慮購買價格和壽命的因素。
3．產(chǎn)品的人體工程學(xué)設(shè)計主要可以考慮以下幾點：
第一，完成一個移液循環(huán)拇指的移動距離短，意味著舒適度更高；
第二，比較相同量程的移液器完成一次排液（一定要按到底）所需的拇指用力，這是影響舒適性的關(guān)鍵，用力越少意味著長期使用造成手指損傷的風(fēng)險越小；
第三，裝卸吸頭，同樣是越省力越好；
第四，移液器的重量適中，過重會增加手的負擔(dān)，但過輕也往往意味著材質(zhì)可能稍差；
第五，其它的輔助設(shè)計，如殼體的磨砂設(shè)計以及指鉤設(shè)計，有助于進一步提高舒適性。
使用
量程的調(diào)節(jié)
在調(diào)節(jié)量程時，如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)方法，逆時針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可；但如果要從小體積調(diào)為大體積時，則可先順時針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取得最高精確度。
在該過程中，千萬不要將按鈕旋出量程，否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液槍。
槍頭（吸液嘴）的裝配
在將槍頭（pipette tips）套上移液槍時，很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下，這時錯誤的做法，因為這樣會導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件（如彈簧）因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散，甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。如果是多道（如8道或12道）移液槍，則可以將移液槍的第一道對準(zhǔn)第一個槍頭，然后傾斜地插入，往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時）。這時可以采取兩種移液方法。
一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點，然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至第一停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。
二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點，慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至第一停點排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點（千萬別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。
移液器的正確放置
使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
維護保養(yǎng)
移液器應(yīng)根據(jù)使用頻率進行定期維護，但至少每隔3個月維護一次，檢查移液器是否有灰塵和污物，尤其注意其嘴錐部位。長期維護時需要清潔移液器內(nèi)部，必須由經(jīng)培訓(xùn)合格的人員拆卸。
1.移液器的清潔
2.移液器的消毒
可采用常規(guī)高溫高壓滅菌處理或紫外線照射滅菌進行消毒。
常見移液器
微量移液器
微量移液器是生物\化學(xué)實驗室常用的小容量移取液體的單道微量移液器。
由于蒸汽壓,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物質(zhì)時,如油脂,蛋白等,無法吸取。外置活塞移液器卻能勝任。
具有與單道空氣活塞式移液器一樣準(zhǔn)確的精度和誤差系數(shù)。外置活塞移液器
可以適用于高黏度液體，如蛋白，樹脂，最高黏度可達50,000mm2/s，最高密度可達13.6g/cm,如汞等；高蒸汽壓的液體，最高蒸汽壓可達500mbar，無論酒精還是一些碳氫化合物，都能輕松移取。發(fā)泡性液體的移取也毫無問題。
瓶口移液器
根據(jù)型號不同,通常用于中等流量(0.5ml-100ml)的液體的運輸,如酸,堿等,根據(jù)吸取的液體的性質(zhì)不同分為Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF 。可以整體于121℃中消毒。
手動連續(xù)移液器
可以迅速而方便地完成連續(xù)移液工作,可以輕松完成2ul-5000ul的試劑。一次吸液完成49次之多。對于粘稠，高密度液體和高蒸汽壓液體同樣可以準(zhǔn)確移取。適用 于Plastibrand PD吸頭，Combitips吸頭以及其他活塞式吸頭。
電子連續(xù)移液器
利用微處理器控制操作可達到自動識別特定的PD-吸頭
移液體積控制范圍從1ul-50ml，移動7.01ul，70.1ul等將毫無問題。
自動分配，電子連續(xù)移液器可根據(jù)連續(xù)三次移液的平均間隔時間，然后進行分液。(所需時間可自動計算，不需人工計算和輸入)。
電子滴定器
常用于食品，制藥，石油化工等行業(yè)。
體積小，電池壽命長，適合于狹小空間和遠離電源的地方使用。操作簡便，吸入試劑時，按“Fill”鍵，手輪向上旋動，如開始滴定，按“Titr”鍵開始，手輪向下旋動，即開始顯示滴定體積。數(shù)字顯示，減少了人為讀數(shù)和計算體積時所帶來的誤差。無需工具，用戶可自行校準(zhǔn)。
移液器校準(zhǔn)
清潔后的移液器需要校準(zhǔn)。移液器校準(zhǔn)時必須在室溫條件(25+/-2℃)下進行。參照移液器的使用說明，不同刻度10000@0@0?ul必須分別進行校準(zhǔn)。
- 將移液頭里的氣泡排除，選擇好需要校準(zhǔn)的刻度。
- 按加液鍵，將水加入空容器中稱重，記錄讀數(shù)。
- 按照國標(biāo)，移液器的校準(zhǔn)采用“三點測試（最大量程的100%，50%和10%），每點六次”的規(guī)則，而供應(yīng)商通常會選擇兩種規(guī)則：一是簡易校準(zhǔn)，也就是兩點測試（最大量程的100%和10%），每點四次；二是嚴(yán)格校準(zhǔn)，也就是三點測試（最大量程的100%，50%和10%），每點十次。使用者根據(jù)自己的實際需求選擇一種規(guī)則完成測試后即進入計算環(huán)節(jié)。（根據(jù)平均值與實際值間的絕對差值進行調(diào)節(jié)，用工具來擰彈簧卡扣的松緊）
檢修常識
常見問題 | 原因 | 解決方法 |
移液器滲漏 | ●使用了不合適的吸頭 | ●用原廠的吸頭 |
●吸頭安裝不正確 | ●穩(wěn)妥安裝吸頭 | |
●吸頭圓錐磨損貨污染 | ●清洗安全圓錐 ●更換安全圓錐 | |
●活塞密封磨損或潤滑劑不足 | ●清洗并給墊圈重上潤滑劑 ●更換墊圈 | |
●儀器損壞 | ●送去維修 |
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使用方法
1.選擇合適的移液器
移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時多使用空氣置換移液器，移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定中的加樣時使用正向置換移液器。如移取15ul的液體，最好選擇最大量程為20ul的移液器，選擇50ul及其以上量程的移液器都不夠準(zhǔn)確。
2.設(shè)定移液體積
調(diào)節(jié)移液器的移液體積控制旋鈕進行移液量的設(shè)定。調(diào)節(jié)移液量時，應(yīng)視體積大小而旋轉(zhuǎn)刻度至超過設(shè)定體積的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，以保證移取的最佳精確度。
3.裝配吸頭
4.移液
保證移液器、吸頭和待移取液體處于同一溫度；然后用待移取吸液體潤洗吸頭1-2次，尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時，將吸頭尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度(嚴(yán)禁將吸頭全部插入溶液中),緩慢均勻地松開操作桿，待吸頭吸入溶液后靜置2-3秒，并斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多余的液體。
5. 移液器的放置
使用移液器完畢后，用大拇指按住吸頭推桿向下壓，安全退出吸頭后將其容量調(diào)到標(biāo)識的最大值，然后將移液器懸掛在專用的移液器架上；長期不用時應(yīng)置于專用盒內(nèi) 。
移取方法
- 反向移液法先按下按鈕至第二停點位置，慢慢松開移液操作桿回原點，排出液體時將移液操作桿按至第一停點位置排出設(shè)置好體積的液體，繼續(xù)保持按住移液操作桿位于第一停點位置取下有殘留液體的吸頭而棄之。
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