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特殊染色
基本信息
| 中文名 | 特殊染色 |
| 拼音 | tè shū rǎn sè |
| 應(yīng)用 | 器官硬化性疾病的觀察 |
| 價值 | 很有實用價值的技術(shù) |
| 包括 | 網(wǎng)狀纖維染色、彈力纖維染色 |
應(yīng)用價值
現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益廣泛，但由于這些技術(shù)要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴，對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢，在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價值。
比如，當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素，是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等，用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡單，所以組織化學(xué)技術(shù)，雖然已有幾十年到幾百年的歷史，仍是一個很有實用價值的技術(shù)。
常用特染
膠原纖維的染色
凡是間葉組織細(xì)胞都可產(chǎn)生網(wǎng)織纖維，也可產(chǎn)生膠原纖維，纖維母細(xì)胞是產(chǎn)生膠原纖維的主要細(xì)胞。膠原纖維是結(jié)締組織中的主要纖維，是結(jié)締組織中起支持作用的重要部分，具有一定的韌性和堅固性，能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯開1/4平行排列交聯(lián)成膠原原纖維，膠原原纖維再聚合成較寬的結(jié)構(gòu)。按膠原的化學(xué)成分可分為15種，間質(zhì)中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成，新鮮時呈白色，故又稱為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色，與周圍間質(zhì)區(qū)分不是很清楚。染色后，便可明顯區(qū)別開來，易于觀察病變時膠原纖維的變化。
應(yīng)用
膠原纖維染色
網(wǎng)狀纖維染色
網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維，大量堆積時則形成致密的網(wǎng)狀，故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少，它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處，如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi)，毛細(xì)血管周圍以及造血器官，內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。
網(wǎng)狀纖維的變化，反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程，對疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂，都是病理檢驗的重要指標(biāo)，尤其是在臨床病理診斷中，可根據(jù)其存在和分布來鑒別癌與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上，網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色，在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。
應(yīng)用：
（1）癌與肉瘤的鑒別：在網(wǎng)狀纖維染色下可清楚顯示出肉瘤每一個細(xì)胞周圍有網(wǎng)狀纖維圍繞，或似為團(tuán)狀或巢狀的瘤組織，但團(tuán)巢內(nèi)仍有破碎的網(wǎng)狀纖維，癌顯示為明顯巢或索狀，巢內(nèi)無網(wǎng)狀纖維。
（2）骨基質(zhì)與濃縮的分泌物、血漿或水腫液的鑒別：骨基質(zhì)內(nèi)有網(wǎng)狀纖維，而后者無。
（3）炎癥細(xì)胞與癌細(xì)胞的鑒別：在支氣管活檢中有時擠壓較重，一些深染的細(xì)胞擠壓成團(tuán)，難以判斷是受擠壓的炎癥細(xì)胞。這種病例染網(wǎng)狀纖維有利于鑒別，炎癥細(xì)胞不成巢，小細(xì)胞癌可有巢狀或索狀結(jié)構(gòu)。
（4）壞死與死后自溶的鑒別：在胰腺是生前壞死還是死后自溶有時很難鑒別，染網(wǎng)狀纖維，前者網(wǎng)狀纖維支架破壞較嚴(yán)重，結(jié)構(gòu)塌陷，而后者雖然死后自溶嚴(yán)重，但網(wǎng)狀纖維支架結(jié)構(gòu)常可保存。
（5）血管性腫瘤的鑒別：有時血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤與血管周圍細(xì)胞瘤常規(guī)染色較難鑒別，網(wǎng)狀纖維染色，可顯示清楚的血管結(jié)構(gòu)，看清腫瘤細(xì)胞與血管關(guān)系有利于鑒別。內(nèi)皮細(xì)胞性腫瘤，腫瘤位于血管壁的網(wǎng)狀支架內(nèi)，而外周細(xì)胞則圍繞著血管壁或與之呈放射狀排列。
a．慢性活動性肝炎壞死灶有時較難辨認(rèn)，染網(wǎng)狀纖維顯示局部有網(wǎng)狀支架的破壞與崩解，結(jié)合HE切片較易判斷小灶狀壞死。
b．慢性活動性肝炎輕度纖維化，在網(wǎng)狀纖維染色下較易判斷。
c．慢性淤血性肝硬變有時較難判斷，網(wǎng)狀纖維較易觀察中央靜脈及小葉下靜脈通道上的網(wǎng)狀纖維增生。增生較明顯，有反包圍現(xiàn)象，形成假小葉結(jié)構(gòu)，就可診斷淤血性肝硬變。
（8）有助于癌浸潤的診斷，有些上皮性腫瘤是否早期突破基底膜形成浸潤，HE染色難以確診，而網(wǎng)狀纖維染色可較清楚顯示基底膜，較易確定基底膜有無早期浸潤破壞現(xiàn)象。
（9）腦內(nèi)原發(fā)瘤與轉(zhuǎn)移瘤的鑒別：腦內(nèi)絕大多數(shù)腫瘤網(wǎng)狀纖維很少，只有血管周圍有少量網(wǎng)狀纖維，而轉(zhuǎn)移癌及肉瘤都有明顯的網(wǎng)狀纖維，故有利于鑒別。
（10）非干酪性結(jié)核與結(jié)節(jié)病的鑒別：后者結(jié)節(jié)內(nèi)及結(jié)節(jié)周圍較早出現(xiàn)明顯的網(wǎng)狀纖維，觀察此有利于二者鑒別。
（11）淋巴結(jié)病變的判斷：
網(wǎng)狀纖維染色
彈力纖維染色
彈力纖維是結(jié)締組織發(fā)生形成較晚的一種纖維，在創(chuàng)傷修復(fù)中一般在4—5周才有較明顯的彈力纖維形成。彈力纖維艱固、較小而彈性較大，容易伸展，在結(jié)締組織起彈性作用。彈力纖維由彈性蛋白組成，新鮮時呈黃色又稱黃纖維。彈力纖維纖維分枝連成網(wǎng)，折光性強(qiáng)，含量多時在HE染片上呈折光性強(qiáng)的粉紅色，量少的不顯色。故量多時與膠原纖維不易區(qū)別，量少則不能觀察。彈力纖維染色主要用于觀察彈力纖維有無增生、腫脹、斷裂、破碎及萎縮或缺如等病變。
應(yīng)用：
（1）動靜脈的辨認(rèn)：在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認(rèn)時，彈力纖維染色有助于辨認(rèn)。有彈力板者為動脈，有彈力纖維構(gòu)成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強(qiáng)，故彈力性纖維構(gòu)成血管輪廓不易損壞。
（2）彈力纖維瘤的診斷：彈力纖維染色可見瘤樣病變內(nèi)有大量彈力纖維增生，非真性腫瘤。
（3）心血管先天性彈力組織增生，這組疾病有先天性內(nèi)膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。
（5）一些與彈力纖維變化有關(guān)的皮膚疾病的診斷與鑒別診斷：這組疾病有皮膚松弛癥，萎縮性硬化性苔蘚等，其診斷與鑒別診斷常依賴于彈力纖維染色，以觀察彈力纖維變化。
糖類染色
糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分，可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原，它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些腫瘤的病變中分布和量都有一定改變，故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。
（1）肝及心肌糖原沉著癥的診斷：糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。
（3）高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別：前者為陽性、后者為陰性，做此染色較易鑒別。
（4）骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷：此瘤 80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原，糖原染色為陽性，所以糖原染色為陽性（大多數(shù)細(xì)胞）可以協(xié)助診斷。
（5）腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤：前者棒狀小體糖原染色為陽性。
（6）間皮瘤或滑膜肉瘤與其它癌的鑒別：前者分泌含透明質(zhì)酸的粘液，糖原染色為陽性，但透明質(zhì)酸酶消化后即呈陰性反應(yīng)，如有此染色特點，即可有助于診斷滑膜肉瘤或間皮瘤而不是癌。
粘液染色
應(yīng)用：
（1）水腫與粘液變性：皮膚真皮水腫與粘液變性有時較難以從組織學(xué)上區(qū)別，染粘液有助于鑒別。
（2）硬皮病與硬腫病的鑒別：后者膠原纖維增生，纖維之間粘液陽性物質(zhì)增多，有助于這兩者之間的鑒別。
色素染色
（含鐵血黃素及黑色素）
含鐵血黃素是由漏出于血管外的紅細(xì)胞，被巨噬細(xì)胞吞噬后，分解血紅蛋白產(chǎn)生的顆粒，HE染色為棕黃色，故稱為含鐵血黃素。因有時與福爾馬林沉渣及黑色素等難相區(qū)別，故做含鐵血黃素染色。
應(yīng)用：
主要用于同其它色素鑒別，若為陽性，顯示陳舊性出血。黑色素常見于皮膚色素細(xì)胞，惡性黑色素瘤常可產(chǎn)生黑色素。組織內(nèi)大量存在時呈棕黑色，易于鑒別。但少量存在時便難與其它色素相鑒別，須作黑色素染色。
應(yīng)用：
（1）黑色素瘤的診斷與鑒別診斷：腫瘤細(xì)胞內(nèi)色素是否為黑色素，染黑色素有助于確定黑色素性質(zhì)及腫瘤的定性診斷。
（2）血色病與黑便病：真皮內(nèi)有色素沉著，黑色素陰性而含鐵血黃素陽性者可能為前者。
神經(jīng)原纖維染色
神經(jīng)原纖維呈細(xì)線狀，存在于神經(jīng)細(xì)胞體及樹突中，它們形成一個稠密的網(wǎng)狀，軸突中的原纖維也互相交織在一起，且伸延至軸突全長。在HE染色中呈粉紅色，難與膠原纖維相區(qū)別，故須作神經(jīng)纖維染色。
應(yīng)用：
（1）有利于觀察神經(jīng)原纖維的損傷。
（2）神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的診斷與鑒別診斷：如神經(jīng)母細(xì)胞瘤與未分化癌的區(qū)別等。
病原微生物染色
真菌和霉菌：真菌引起的病變雖然多種多樣，但都不具有特異性，且真菌在HE染色中均顯藍(lán)色，故須作真菌染色。
應(yīng)用：
細(xì)菌：細(xì)菌在HE染色上不能分類，故須作細(xì)菌染色。
應(yīng)用：
（1）一些疑為細(xì)菌感染性炎癥，可用細(xì)菌染色進(jìn)一步確定病原診斷。如傷寒肉芽腫性炎或葡萄球菌性炎等化膿性炎癥的診斷中細(xì)菌染色有很重要的診斷價值。
注意事項
染色前：
②撈片時，最好一張玻片撈一個組織，組織最好位于玻片的中間，美觀的同時也利于脫蠟（有時二甲苯的液面低于組織片的時候，達(dá)不到脫蠟的目的）。
③石蠟切片脫蠟到水時，一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底（脫蠟時間不能太少）以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面，在染色時染色液未能充分與組織接觸，最終導(dǎo)致染色效果不佳，甚至染不上顏色。
④在染色過程中最好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙，以避免脫蠟時把標(biāo)簽紙也浸沒，致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上，造成染色不佳。
⑤在染色前，用有色鉛筆在組織周圍劃一個圈，這樣在滴加染液時就不會使染液溢出。
染色時：
①染色時必須嚴(yán)格按照染色操作說明書進(jìn)行染色。
②在染色過程中，前一個染液浸染完成后，在進(jìn)行下一個染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。
③ 每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。
④在滴加染液時，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費試劑。
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